توضیحات

پودر MTT (رنگ تترازولیوم)

MTT یا رنگ Thiazolyl Blue Tetrazolium Bromide یک ترکیب شیمیایی مهم و پرکاربرد در آزمایش‌های زیستی است. این ماده به صورت یک ترکیب زرد رنگ و محلول در آب وجود دارد که می‌تواند از غشای سلولی نفوذ کند و وارد سلول‌ های زنده شود. مکانیسم عمل پودر MTT بر پایه فعالیت آنزیمی ردوکتازهای میتوکندریایی است که تنها در سلول‌های زنده فعال هستند. این آنزیم‌ ها MTT را احیا می کنند و این ترکیب به یک ماده غیر قابل حل به نام فورمازان با رنگ آبی تیره تبدیل می شود.

این تغییر رنگ، به محققان این امکان را می‌دهد که میزان تکثیر سلولی و زنده ماندن سلول‌ها را با دقت ارزیابی کنند. در آزمایش‌ های MTT assay، شدت رنگ آبی مستقیماً با تعداد سلول‌ های زنده و فعال ارتباط دارد، به این معنی که هرچه سلول‌ های بیشتری زنده باشند، رنگ بیشتری تولید می‌شود.

پودر MTT در بسیاری از زمینه‌ های پژوهشی، از جمله تست‌ های سمیت سلولی، بررسی اثرات دارویی و مطالعات بر روی سرطان، استفاده گسترده‌ ای دارد. این ماده به محققان کمک می‌کند تا بتوانند اثر دارو ها یا ترکیبات مختلف را بر روی زنده ماندن سلول‌ ها و توانایی آن‌ ها در تکثیر به شکل قابل اندازه‌ گیری ارزیابی کنند.

سوبسترای MTT به سلول‌ های در حال کشت اضافه می‌شود، معمولاً در غلظت نهایی 0.2-0.5 میلی‌گرم/میلی‌لیتر، و به مدت 1 الی 4 ساعت انکوبه می‌شود. سپس، سلول‌ ها و محصول فورمازان با یک حلال آلی  مثل ایزوپروپانول، DMSO و غیره حل می شود و جذب نوری در 570 نانومتر با استفاده از یک اسپکتروفتومتر چند چاهکی اندازه‌گیری خواهد شد. وقتی سلول‌ ها می‌میرند، توانایی تبدیل MTT به فورمازان را از دست می‌دهند، بنابراین تشکیل رنگ به عنوان نشانه‌ای از سلول‌های زنده تلقی می‌شود.

آزمون سنجش زنده مانی ام تی تی به دلیل اقتصادی بودن، دقت، سرعت بالا و عدم نیاز به مراحل شستشو در آزمایشگاه‌ های دانشگاهی مورد استفاده قرار می‌گیرد. این روش برای غربالگری تعداد زیادی از نمونه‌ها به طور همزمان بسیار مفید است.

بایوتکنولب به عنوان یک مرجع جامع در زمینه خرید و فروش مواد شیمیایی و مصرفی آزمایشگاهی، آماده ارائه خدمات در زمینه فروش پودر MTT می‌باشد. شما می‌توانید خرید MTT سیگما ثنا شیمی را با کیفیت بالا و قیمت مناسب به راحتی از همین صفحه از انجام دهید. اطلاعات تکمیلی و جزئیات تخصصی لازم برای خرید پودر  mtt Sigma (کد A0169) در جدول توضیحات تکمیلی همین صفحه موجود است. مواردی مانند کد محصول، وزن مولکولی، کاربردها و سایر جزئیات در این بخش قابل مشاهده هستند.

کاربرد رنگ MTT

MTT یک نوع آزمون رنگ‌سنجی است که برای ارزیابی فعالیت متابولیکی سلول‌ها استفاده می‌شود. آنزیم‌ های اکسیدوردوکتاز وابسته به NAD(P)H می توانند تعداد سلول‌ های زنده را مشخص کنند. این آنزیم‌ها قادر به کاهش رنگ‌ زایی تترازولیوم  هستند . آزمون‌های رنگ‌زایی با استفاده از تترازولیوم می‌توانند سمیت سلولی (کاهش تعداد سلول‌های زنده) یا فعالیت سیتواستاتیک (تغییر از تکثیر به خاموشی) عوامل دارویی و مواد سمی را اندازه‌گیری کنند. جذب نور محلول حاوی فورمازان توسط اسپکتروفوتومتر در طول موج مشخصی (معمولاً بین 500 و 600 نانومتر) اندازه‌گیری می‌شود.

چالش ها

در MTT مطالعات تکثیر و سمیت سلولی بر پایه اندازه‌گیری فعالیت آنزیم میتوکندریایی، انجام می شود. بر همین اساس سیگنال ها در این آزمون به سطح متابولیسم سلولی نیز بستگی دارند. شرایط کشت می‌تواند متابولیسم را تحت تأثیر قرار دهد و به تبع آن نرخ کاهش MTT به فورمازان را تغییر می کند. به عنوان مثال، در سلول‌های چسبنده، متابولیسم ممکن است زمانی که رشد توسط تماس در یک کشت سلولی متراکم مهار می‌شود، کاهش یابد. از سوی دیگر، متابولیسم ممکن است زمانی افزایش یابد که اجزای نانوذرات (NPs) به عنوان مواد مغذی توسط سلول استفاده شوند. شرایط نامساعد دیگر مانند تغییر pH یا کاهش مواد مغذی اساسی مثل گلوکز نیز می‌توانند تأثیرگذار باشند.

محدودیت‌ های آزمون MTT

این آزمون برای برخی نانوذرات (مثل کربن) معتبر نیست به دلیل تعامل یا جذب محصول فورمازان. این آزمون در واقع محصول یک واکنش کاهش (فورمازان) را اندازه‌گیری می‌کند. ترکیبات کاهنده مثل پاکلیتاکسل، سیس‌پلاتین، کوآنزیم A، اسید اسکوربیک و یا DTT می‌توانند MTT را به صورت غیرآنزیمی کاهش دهند.

نکات کاربردی

• شک به تداخل شیمیایی نانوذرات باید با اندازه‌گیری مقادیر جذب از چاه‌های کنترل که حاوی محیط کشت، MTT و غلظت‌های مختلف نانوذرات بدون سلول هستند، تأیید شود.
• حل فورمازان با استفاده از DMSO، SDS، حلال‌های آلی و ایزوپروپانول اسیدی انجام می‌شود تا رنگ تثبیت شود، از تبخیر جلوگیری گردد و تداخل اجزای محیط کشت کاهش یابد. همچنین، می‌توان حداکثر جذب را در طول موج‌های دیگر تغییر داد تا از تداخل جلوگیری شود.
• سیگنال دریافتی به غلظت MTT، زمان انکوباسیون، تعداد سلول‌ های زنده و فعالیت متابولیک آن‌ ها وابسته است. هنگام بهینه‌ سازی شرایط آزمون، این پارامتر ها باید در نظر گرفته شوند تا مقدار کافی از محصول که از پس‌زمینه قابل تفکیک باشد، تولید شود.

* آزمون‌های MTT معمولاً در تاریکی انجام می‌شوند زیرا این ترکیب حساس به نور است*

خرید پودر MTT

شما می توانید خرید رنگ MTT و تمامی مواد شیمیایی و مصرفی آزمایشگاهی مورد نیاز خود را از پلتفرم بایوتکنولب انجام دهید. هم چنین می توانید به طور خاص پودر MTT سیگما را برای نیاز های آزمایشگاهی و مطالعات سلولی و مولکولی خود در کم ترین زمان تهیه کنید. وب‌ سایت بایوتکنولب با قیمت‌های رقابتی، تحویل سریع و شفافیت اطلاعات محصول در حوزه فروش MTT و سایر مواد شیمیایی تحقیقاتی، در خدمت آزمایشگاهیان، دانشجویان و پژوهشگران می باشد.

برای دریافت مشاوره در زمینه خرید پودر mtt، خرید پودر MTT سیگما، استعلام قیمت پودر MTT سیگما، خرید کیت MTT، اطلاع از قیمت کیت mtt، نحوه انجام سنجش زنده مانی سلولی، خرید رنگ تترازولیوم و سفارش پودر mtt سیگما در مقادیر دلخواه می توانید با کارشناسان ما در ارتباط باشید.